La surface oculaire est constamment exposée à divers facteurs environnementaux, et l'immunité innée et adaptative jouent des rôles cruciaux dans les maladies de la surface oculaire (OSD). Auparavant, nous avons rapporté que l'application topique de RCI001 confère d'excellents effets anti-inflammatoires et antioxydants dans les modèles de syndrome de l'œil sec et de brûlure chimique oculaire. Dans cette étude, nous avons examiné les effets inhibiteurs de RCI001 sur les inflammasomes Rac1 et NLRP3 in vitro et in vivo. Après application de RCI001 sur les cellules RAW264.7 et Swiss 3T3, nous avons mesuré l'activité de Rac1 à l'aide d'un essai de précipitation par glutathion-S-transférase (GST) et d'un kit d'essai d'activation des protéines G. En outre, nous avons quantifié l'expression des cytokines inflammatoires (interleukine [IL]-1b, IL-6 et facteur de nécrose tumorale [TNF]-a) dans les cellules RAW264.7 stimulées par le lipopolysaccharide (LPS) en utilisant ELISA et PCR en temps réel. Dans le modèle de brûlure alcaline oculaire chez la souris, RCI001 a été administré par instillation oculaire (10 mg/mL, deux fois par jour) pendant 5 jours, et la suspension ophtalmique d'acétate de prednisolone (PDE) à 1 % a été utilisée comme contrôle positif. L'intégrité de l'épithélium cornéen (aux jours 0 à 5) et les examens histologiques ont été réalisés, et les niveaux de transcrits et de protéines de Rac1, NLRP3, caspase-1 et IL-1b ont été quantifiés par PCR en temps réel et western blotting dans les tissus cornéens collectés aux jours 3 et 5. Nous avons observé que RCI001 inhibe de manière dose-dépendante l'activité de Rac1 et diverses cytokines inflammatoires dans les macrophages murins stimulés par le LPS. De plus, RCI001 a restauré l'intégrité de l'épithélium cornéen plus rapidement que le traitement par corticostéroïdes dans les cornées lésées chimiquement. Par rapport au groupe témoin traité par solution saline, l'activation de Rac1 et de l'axe NLRP3 inflammasome/IL-1b a été supprimée dans le groupe RCI001, en particulier lors de la phase précoce du modèle de brûlure alcaline oculaire. RCI001 topique a supprimé l'expression de Rac1 activé et des cytokines inflammatoires in vitro et a rapidement restauré la cornée lésée en inhibant l'activation de Rac1 et de l'axe NLRP inflammasome/IL-1b in vivo. En conséquence, RCI001 pourrait être un agent thérapeutique prometteur pour le traitement des OSD.
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2022.850287/abstract